组织芯片制备

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组织芯片的制备步骤介绍

2020-01-15

组织芯片的制备步骤

  根据制作方法,可以分为石蜡包埋的组织芯片和冰冻芯片两种。肿瘤中常用的是石蜡包埋的组织芯片,通过组织芯片制作机细针打孔的方法,从众多的组织蜡块(称为供体蜡块)中采集到数十至上百的圆柱形小组织(组织芯),并将其整齐排列另一空白蜡块(称为受体蜡块)中,而制成组织芯片蜡块。然后对组织芯片蜡块进行切片,再将切片转移到载玻片上制成组织芯片。
  其制作步骤如下:

  制作模具蜡块,大小为45mm×20mm,在模具蜡块上打出间距为0.1 mm、直径为0.6 mm 的小孔,每个小孔以坐标准确定位;

  样本蜡块根据HE染色观察,对石蜡标本中有代表性的点进行标记,包括典型的肿瘤和相应的正常组织,选定并分别在HE切片和相应石蜡组织块上标记取样组织的位点,用内径0.6 mm 的不锈钢针进行穿刺,深度2~3mm,将其固定于模具蜡块的小孔内;

  切片前,蜡块需在4中预冷4h左右,然后夹在切片机上进行修正,等修到全部组织完整为止。用-20预冷冰袋贴在蜡块上5-10min左右,快速连续切片30-50张左右,再用冰袋冷冻组织块。

  将模具蜡块以4μm厚度切片,敷贴于载玻片或尼龙膜等固相载体上,就制成了组织芯片。

组织芯片

  图:组织芯片制备流程示意图


  小结与展望

  组织芯片作为一项新兴的生物学研究技术, 正以它优越性展示着自己的潜力。它的应用实现了对细胞、蛋白、核酸等生物组分的准确、快速、大信息量的检测,使实验效率大大提高。同时与二代测序技术配合使用,在寻找肿瘤基因变异及分子标志物中有很好的互补作用,提供了肿瘤诊断和预后的分子标志物的批量检测,在肿瘤研究中发挥着不可取代的作用。我们相信,在生命科学飞速发展的后基因组时代,组织芯片将在肿瘤研究中发挥越来越重要的作用。

 


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